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肉毒堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶(CPT1)測試盒

簡要描述:

肉毒堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶(CPT1)測試盒是存在于線粒體內(nèi)膜的一類?;D(zhuǎn)移酶。可逆地催化從?;o酶將酰基轉(zhuǎn)移至L-肉毒堿的反應(yīng),在轉(zhuǎn)運(yùn)脂肪酸通過線粒體內(nèi)膜的過程中起重要作用。

更新時間:2024-09-02;廠商性質(zhì):經(jīng)銷商;覽量:1324

商品詳情:
肉毒堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶(CPT1)測試盒正式測定前務(wù)必取2-3個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定

測定意義:

肉毒堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶是存在于線粒體內(nèi)膜的一類?;D(zhuǎn)移酶??赡娴卮呋瘡孽;o酶將?;D(zhuǎn)移至L-肉毒堿的反應(yīng),在轉(zhuǎn)運(yùn)脂肪酸通過線粒體內(nèi)膜的過程中起重要作用。

貨號

規(guī)格

檢測方法

YSH3387

100管/96樣

微量法

YSH3387-1

50管/48樣

可見分光光度法

測定原理:

基于肉堿和脂酰輔酶在丙二酰輔酶存在與否的條件下,通過肉堿脂酰轉(zhuǎn)移酶(CPT-I)的作用,產(chǎn)生脂酰肉堿,并釋放出巰基輔酶(COA-SH),與Ellman試劑DN-TB反應(yīng)后,產(chǎn)生黃色的TNB。通過其吸收峰值得變化(412nm),來定量分析CPT-1的活性。

需自備的儀器和用品:

可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰、無水乙醇和蒸餾水
樣品中AA提取:

1.按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進(jìn)行室溫勻漿,然后轉(zhuǎn)移到1.5 mL EP 管中,蓋緊后(防止水分散失)置于沸水浴提取15 min;自來水冷卻后,8000g,,4℃離心10min,上清液置冰上待測。

2.細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL試劑一),超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次);8000g,4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

3.血清等液體:直接檢測。

計(jì)算公式如下:

1、血清(漿)LAP活力的計(jì)算:

單位的定義:每mL血清(漿)每分鐘生成1 nmol的對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。

LAP(nmol/min/mL)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷V樣÷T=205.8×ΔA

2、組織、細(xì)菌或細(xì)胞中LAP活力的計(jì)算:

1)按樣本蛋白濃度計(jì)算:

單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol 對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。

LAP(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr

2)按樣本鮮重計(jì)算:

單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmol 對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。

LAP(nmol/min /g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T=205.8×ΔA÷W

3)按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算:

單位的定義:每1萬個細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘生成1 nmol 對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。

LAP(nmol/min /104 cell)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(2000×V樣÷V樣總) ÷T=0.103×ΔA

V反總:反應(yīng)體系總體積,2×10-4 L;ε:對硝基苯胺摩爾消光系數(shù),9.72×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.05 mL;V樣總:加入提取液體積,1 mL;T:反應(yīng)時間,2 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;2000:細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù),2000萬。

注意事項(xiàng):

1. 試劑盒中試劑三、試劑四和標(biāo)準(zhǔn)品均需臨用前配制,且避光保存,配制好未使用完的4℃保存且3天內(nèi)使用完畢。

2. 為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,需先取1-2個樣做預(yù)實(shí)驗(yàn),如果測定的吸光值過高(高于2.5),用蒸餾水稀釋后再測定。

3. 與茚三酮反應(yīng)在570nm處無吸收峰,因此,570nm處測定結(jié)果不含這兩種氨基酸的量。

4.檢出限為100μmol/L。

信號素3GELISA試劑盒 SEMA3G免費(fèi)代測試劑

信號素3FELISA試劑盒 SEMA3F免費(fèi)代測試劑

信號素3DELISA試劑盒 SEMA3D免費(fèi)代測試劑

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信號傳導(dǎo)轉(zhuǎn)錄激活因子5BELISA試劑盒 STAT5B免費(fèi)代測試劑

信號傳導(dǎo)轉(zhuǎn)錄激活因子5AELISA試劑盒 STAT5A免費(fèi)代測試劑

信號傳導(dǎo)轉(zhuǎn)錄激活因子2ELISA試劑盒 STAT2免費(fèi)代測試劑

信號傳導(dǎo)轉(zhuǎn)錄激活因子1ELISA試劑盒 STAT1免費(fèi)代測試劑

鋅指同源框蛋白4ELISA試劑盒 ZFHX4免費(fèi)代測試劑

心臟肌球蛋白結(jié)合蛋白CELISA試劑盒 MYBPC3免費(fèi)代測試劑

心磷脂酰基轉(zhuǎn)移酶1ELISA試劑盒 LCLAT1免費(fèi)代測試劑

心磷脂合酶ELISA試劑盒 CLS免費(fèi)代測試劑

心肌型蘭尼定受體2ELISA試劑盒 RYR2免費(fèi)代測試劑

心肌素ELISA試劑盒 MYOCD免費(fèi)代測試劑
肉毒堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶(CPT1)測試盒淀粉比色法檢測試劑盒 可見分光光度法 50管/48樣

直鏈淀粉比色法檢測試劑盒 微量法100管/96樣

直鏈淀粉比色法檢測試劑盒 可見分光光度法 50管/48樣

支鏈淀粉比色法檢測試劑盒 微量法100管/96樣

支鏈淀粉比色法檢測試劑盒 可見分光光度法 50管/48樣

α比色法檢測試劑盒 微量法 100管/48樣

α比色法檢測試劑盒 可見分光光度法 50管/24樣

β比色法檢測試劑盒 微量法 100管/48樣

β比色法檢測試劑盒 可見分光光度法 50管/24樣


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